選購ELISA試劑盒要考慮這四個因素

2022-04-11 隨著科學(xué)技術(shù)和新興工業(yè)的發(fā)展，ELISA試劑盒對化學(xué)試劑的純度、凈度以及精密度要求愈加嚴(yán)格和專門化。ELISA試劑盒選擇十分重要了，主要參考以下四個方面：一、檢測方式如今檢測ELISA試劑盒有許多途徑，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)具有特征性的顏色，可以通過分光光度計進(jìn)行檢測，堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)...

ELISA試劑盒的包被與封閉有哪些不同？

2022-02-23 包被用抗原或抗體的濃度，包被的溫度和時間，包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗的特點和材料的性質(zhì)而選定。抗體和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液，也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA試劑盒板孔中加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置過夜，37℃中保溫2小時被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化，每批材料需通過實驗與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-2...

使用白介素ELISA試劑盒要注意這些細(xì)節(jié)

2022-02-22 白介素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法作為測定的方法時，試劑盒的組成一般包括：已包被單抗的酶標(biāo)板：一塊，有96孔的，也有48孔的，可拆缷，外面有鋁箔袋密封，打開后有干燥劑，實驗時暫未使用的酶標(biāo)條要連帶干燥劑密封好，放在4℃冰箱中妥善保存。今天我們主要介紹其測定原理。現(xiàn)在白介素ELISA檢測試劑盒除非是測定抗體的以外，一般使用的是雙抗體夾心法，此種方法大多數(shù)用的是增強(qiáng)的雙抗體夾心法，即使用生物素-親和素系統(tǒng)，還有少數(shù)的指標(biāo)可能使用競爭法，這類方法適用于半抗原的測定。具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)...

ELISA試劑盒溫育常用的溫度有哪些？

2021-12-29 ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。ELISA試劑盒溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)...

ELISA試劑盒的選擇要考慮這幾個因素

2021-12-27 目前ELISA試劑盒在實驗室已經(jīng)相當(dāng)普及，絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測未知樣本中抗原的濃度。用商業(yè)化試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多，ELISA試劑盒不僅可以讓實驗更便利，往往還更加。現(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國產(chǎn)品牌也有進(jìn)口品牌，數(shù)量繁多令人目不暇接，怎樣才能選出適用的產(chǎn)品呢？1.試劑盒特異性ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分--抗體對有關(guān)，若抗體對中之一為多抗，另一個必須為單抗，建議使用雙單抗。在選擇市面上的試劑盒時，先閱讀相關(guān)產(chǎn)品的說明書，了解試劑...

影響ELISA測試結(jié)果的幾個因素分析

2021-11-26 ELISA測定的陽性判斷值,通常是將大量陰性和陽性人群的測定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析后確定的,其確定依據(jù)為判斷結(jié)果的假陽性和假陰性率低。在陽性判斷值周圍一定范圍內(nèi)之外的測定結(jié)果可歸為可疑,亦即ELISA測定的“灰區(qū)”。“灰區(qū)”的大小可用統(tǒng)計學(xué)方法確定。測定結(jié)果處于“灰區(qū)”的樣本,可通過確認(rèn)試驗或追蹤檢測來確定到底是陽性還是陰性ELISA“灰區(qū)”是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。目前各種形式的ELISA自動分析儀已經(jīng)進(jìn)入市場,如廣泛應(yīng)用于血站系統(tǒng)的微板式全自動酶免分析儀...

說說洗滌在ELISA試劑盒過程中的作用

2021-11-16 在進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）實驗中，有很多需要注意的地方，由于ELISA方法廣泛應(yīng)用在各種抗原和抗體的此定中。但是測定中的影響因素很多，并且對操作有較高的要求，所以，在實驗中除了正常的相互反應(yīng)，還會出現(xiàn)錯誤的反應(yīng)，導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。洗滌在ELISA試劑盒過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)...

組織蛋白酶V（CTSV）酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2021-10-26 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被組織蛋白酶V（CTSV）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組織蛋白酶V（CTSV）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血...