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介紹elisa試劑盒的幾種保溫方法
2021-06-27
在elisa試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有*貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此...
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介紹白介素ELISA試劑盒的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備步驟
2021-05-24
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4備用。對(duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20備用,有條件的-70凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。介紹白介素ELISA試劑盒的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備步驟:1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2、血漿:應(yīng)根據(jù)...
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如何處理白介素ELISA試劑盒試驗(yàn)中的標(biāo)本
2021-05-21
白介素ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠白介素1α(IL-1α)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠白介素1α(IL-1α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。白介素ELISA試劑盒試驗(yàn)中的標(biāo)本處理:1、某些天然蛋白或重組蛋白,包括...
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elisa試劑盒的保溫方式有哪些
2021-03-27
在elisa試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有*貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此...
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elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前要做好準(zhǔn)備工作
2021-01-15
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)固相載體的挑選:很多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。包被抗體(或抗原)的挑選:將抗體(或抗原)吸附在固相載體外表時(shí),請(qǐng)求純度要好,吸附時(shí)一般請(qǐng)求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃18~24小時(shí)。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌效果,應(yīng)留意防護(hù)。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。現(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體,在運(yùn)用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下...
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大鼠一氧化氮(NO)試劑盒說(shuō)明書
2020-12-21
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷大鼠(Rat)一氧化氮(NO)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被一氧化氮(NO)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的一氧化氮(NO)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處...
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如何添加elisa試劑盒的反響值?
2020-11-24
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)在必定溫度下的反響時(shí)刻并不是反響的結(jié)尾,溫育時(shí)刻過(guò)短、溫度過(guò)低,易致顯色不全;溫育時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)、溫度過(guò)高,易致非特異性緊附于反響孔周圍,難以清潔*,發(fā)生陰性高值或假陽(yáng)性反響。要嚴(yán)厲按規(guī)則的溫度和溫育時(shí)刻進(jìn)行。如果參加的酶物過(guò)多或加在較高的孔壁上或孔口,也會(huì)致使本底添加或假陽(yáng)性。水浴箱門,嚴(yán)厲控制水浴的溫度為37±0.5。同時(shí),微孔板不可堆疊放置,以確保傳熱均勻,各板的溫度都能敏捷到達(dá)平衡。當(dāng)標(biāo)本收集保留不妥發(fā)生溶血時(shí),紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清...
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怎么繪制或ELISA試劑盒的規(guī)范曲線呢?
2020-11-16
很多試劑檢查都涉及到規(guī)范曲線的疑問(wèn),ELISA試劑盒規(guī)范曲線做的好與壞會(huì)直接影響到試驗(yàn)的成果,乃至是到試驗(yàn)的成敗,那么終究怎么繪制或ELISA試劑盒的規(guī)范曲線呢?一、做規(guī)范曲線樣品檢查時(shí)有幾個(gè)疑問(wèn)需求注意1.樣品的濃度等目標(biāo)是依據(jù)規(guī)范曲線計(jì)算出來(lái)的,所以首先要把做規(guī)范曲線看作是比做正式試驗(yàn)還要主要的一件事,不然后邊的試驗(yàn)成果無(wú)從談起。2.設(shè)置規(guī)范曲線樣品的規(guī)范濃度規(guī)模要有一個(gè)對(duì)比大的跨度,而且要能包括你所要檢查試驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在規(guī)范曲線濃度規(guī)模以內(nèi),人ELISA...